Metoda NPL (Najbardziej Prawdopodobnej Liczby, ang. MPN – Most Probable Number) oznaczania Escherichia coli w wodzie przeznaczonej do spożycia polega na statystycznym oszacowaniu liczby bakterii na podstawie wyników wzrostu w serii rozcieńczeń próbki.
Krótki opis:
Przygotowanie próbki: z określonej objętości wody (np. 100 ml) wykonuje się serię rozcieńczeń i rozdziela je do probówek z płynnym podłożem selektywnym, np. bulionem laktozowym z wskaźnikiem i rurką Durhama.
Inkubacja: probówki inkubuje się w temperaturze 37 °C (dla bakterii grupy coli) oraz 44 °C (dla E. coli) przez 24–48 godzin.
Odczyt wyników: obserwuje się zmianę barwy podłoża i wydzielanie gazu, co świadczy o fermentacji laktozy przez bakterie coli.
Potwierdzenie: z dodatnich probówek wykonuje się posiew na podłoża potwierdzające lub testy biochemiczne (np. obecność enzymu β-glukuronidazy) w celu identyfikacji E. coli.
Oszacowanie wyniku: na podstawie liczby dodatnich probówek w poszczególnych rozcieńczeniach odczytuje się z tabeli najbardziej prawdopodobną liczbę (NPL/MPN) bakterii E. coli w 100 ml wody.
Metoda NPL jest szczególnie użyteczna, gdy w wodzie spodziewana jest niewielka liczba bakterii, a próbka jest mętna lub zawiera osady, co utrudnia filtrację membranową.
